Altfragen

Welche Aussagen über IL-1ß treffen zu?

·       Es wirkt in der Zelle und verlässt diese nicht

·       Es enthält eine Signalsequenz

·       Es spaltet Caspasen

·       Es induziert Fieber

·       Es wird als Proform induziert

Beim STAT3 RGA misst man

·       Die Expression von STAT3

·       Die Bindung von STAT3 an einem definierten Genabschnitt

·       Die Phosphorylierung von STAT3

·       Die Bindung von Januskinasen an dem IL-6 Rezeptor

·       Die Aktivierung von Januskinasen

MCF-7 Zellen exprimieren den IL-6 Rezeptor und können somit mit STAT3 Aktivierung auf IL-6 reagieren. Wodurch kann die STAT3 Aktivität bei gleichbleibender IL-6 Konzentration erhöht werden?

·       Silencing des IL-6 Rezeptors

·       Inhibierung des IL-6 Rezeptors

·       Das Expressionslevel des IL-6 Rezeptors hat keinen Einfluss auf die STAT3 Aktivierung

·       Überexpression des IL-6 Rezeptors

STAT3 Aktivierung kann nicht verändert werden

SDS-PAGE: Wählen sie die richtigen Antworten

·       Das diskontinuierliche (Disk-) Elektrophorese-System nach Laemmli besteht aus einem Sammelgel mit pH 6.8 und einem Trenngel mit einem pH von 8.8

·       Das diskontinuierliche (Disk-) Elektrophorese-System nach Laemmli verwendet Chlorid als Folgeion, weil es eine höhere Mobilität hat als alle Proteine

·       DTT kann die Tertiärstruktur von Proteinen verändern und bricht vorhandene Disulfidbrücken auf

·       Das (Disk-) Elektrophorese-System nach Laemmli besteht aus einem Sammelgel mit pH 6.8 und einem Trenngel mit einem pH von 4.8

·       Zusätzlich zum SDS enthält der 4x Probepuffer noch Acrylamid

Wählen sie die richtigen Antworten: Alkaline Phosphatase…

·       Hydrolysiert das Substrat NBT

·       Hat ein pH-Optimum von 6-8

·       Hat ein pH-Optimum von 8-10

·       Hydrolysiert das Substrat BCP (=Phosphorsäurester)

·       Kann durch Tris Base im Puffer gehemmt werden

Endotoxine sind pyrogene Komponenten, die von Gram-negativen Bakterien stammen. Was bedeutet eigentlich „pyrogen“?

·       Autophagie auslösend

·       Fieber auslösend

·       Apoptose auslösend

·       Nekrose auslösend

·       Schmerz auslösend

Das Enzym Luciferase ist als Reportergen besonders geeignet, da es

·       Einen sehr schmalen Messbereich abdeckt

·       Sehr sensitiv ist

·       Einen sehr breiten Messbereich abdeckt

·       In jeder Zelle vorkommt

·       Eine hohe Hintergrundaktivität hat

Wodurch wird der zelluläre Phänotyp hauptsächlich determiniert?

·       Durch die Regulation der Zellteilung

·       Durch die Summe der inaktiven Gene

·       Durch die Aktivierung des EGF-Rezeptorsignalweges

·       Durch differentielle Genexpression

Durch die Summe aller aktiven und inaktiven Kinasen

Die ersten Klonierungsexperimente mit Amphibien haben gezeigt, dass

·       Die genetische Information der Zellen eines mehrzelligen Organismus konstant ist

·       Das Erbgut im Zuge der Differenzierung partiell fragmentiert wird

·       Amphibien geeignete Nutztiere wären

·       Gene ein- und ausgeschaltet werden können

·       Klonieren nur bei Amphibien funktioniert

Die Adenylatcyclase wird von welcher Familie an Rezeptoren reguliert?

·       Rezeptor-Tyrosin-Kinasen

·       G-Protein-gekoppelte Rezeptoren

·       Enzym-gekoppelte Rezeptoren

·       Ionenkanal Rezeptoren

Nukleäre Rezeptoren

Welche Aussagen sind richtig?

·       JAK-Inhibitor reduziert die totale Menge von STAT3

·       IL-6 Behandlung führt zu STAT3 Inhibierung

·       IL-6 Behandlung dephosphoryliert STAT3

·       JAK aktiviert STAT3 durch Phosphorylierung

·       IL-6 Behandlung führt zu STAT3 Aktivierung

Welche Aussage ist richtig? (mehrere Antworten richtig)

·       Um Zellen von ihrer Kulturflasche zu lösen, wird das Enzym Trypsin verwendet

·       FBS hemmt Trypsin

·       MCF-7 Zellen wachsen ohne FBS 

·       Jede Flasche im labor ist steril, d.h. es werden für eine kontaminationsfreie Zellkultur keinerlei spezielle Geräte wie eine Zellkulturbank (=Laminar flow hood) benötigt

·       FBS fördert die Wirkung von Trypsin

Folgende Transkriptionsfaktoren (Yamanaka Faktoren) können in Kombination differenzierte Zellen in pluripotente Stammzellen reprogrammieren: (eine Antwort)

·       TPS3, OCT3, KLF4, SOX4

·       STAT1, STAT3, WNT3, SMAD4

·       SOCS4, MIF3, GLI1, STAT3

·       STAT6, NANOG, ESC, MYC

·       OCT4, SOX2, KLF4, MCY

Welche Eigenschaften muss eine Faser haben, um die frustrierte Phagozytose auszulösen?

·       Flexibel

·       Kohlenstoffhaltig

·       Lang

·       Kurz

·       Steif

Sie möchten den Aktivierungszustand von STAT3 mit Hilfe eines Western Blots untersuchen, Was benötigen sie? (mehrere Antworten)

·       Der Aktivierungszustand von STAT3 kann nicht untersucht werden, da STAT3 sich zufällig und von außen unabhängig auch selbst aktivieren und inaktivieren kann.

·       Mit einem Western Blot kann man keine Proteine analysieren

·       Einen geeigneten Puffer, um die Proteine in den Zellen zu isolieren (Laemmli)

·       Ein geeignetes experimentelles System, z.B. Zellen die STAT3 exprimieren (MCF-7)

·       Proteine werden mit Hilfe der PCR analysiert

Warum wird DMSO zu allen Proben gegeben außer jenen, die bereits dem JAK-Inhibitor enthalten? (eine Antwort)

·       DMSO verhindert das Verlorengehen von Proteinen

·       DMSO verhindert das Absterben der Zellen

·       DMSO kann einfach weggelassen werden, falls keines mehr da ist

·       DMSO schützt das Plastik der 6-Well Platte vor den Zellen

·       Um gleiche Bedingungen in allen Versuchsgruppen zu haben, da der JAK-Inhibitor selbst in DMSO gelöst ist.

SDS-PAGE: Wählen sie die richtigen Antworten:

·       Die Molekülgröße ist der wichtigste Trennparameter in der SDS-PAGE

·       SDS ist eine reduzierende Thiol-Verbindung

·       DTT/Mercaptoethanol beschleunigt die Polymerisation von Acrylamid

·       SDS ist ein Tensid (Ionisches Detergens), welches an Proteine bindet was eine negative Nettoladung ergibt

·       Die Dicke der im Kurs verwendeten Gele war 16 mm

Ordnen sie die passenden und richtigen Aussagen einander zu:

·       Chromatin remodeling Proteine:

·       HDAC-Proteine:

·       DNMT3A Proteine:

·       Histon Acetyltransferasen:

·       Proteine mit einer C2-H2 Zink-Finger DNA Bindungsdomäne:
 

Was ist kein typisches Zeichen für Entzündung

·       Schmerz

·       Temperaturerhöhung

·       Schwellung

·       Nekrose

·       Rötung

Im Übungsteil haben sie folgende Art der Transfektion durchgeführt:

·       Nanopartikel-basierende Transfektion

·       Viruspartikel-basierende Transfektion

·       Elektroporation

·       Calciumphosphat-basierende Transfektion

·       Lipid-basierende Transfektion

Cis-regulatorische Regionen bestehen meist aus:

·       Nicht-codierenden RNAs

·       Proteinen

·       Methylierten Histonen

·       CpG Inseln

·       Enhancern, Promotor-, Silencer- und Insulatorsequenzen

Plasmacytoide DC produzieren große Mengen von:

·       IFN-a und IFN-b

·       TGF-b und IL-10

·       G-CSF und GM-CSF

·       IL-4 und IL-13

·       TNF-a und IL-1a

Der klassische Pathway, der Lectin Pathway und der alternative Pathway des Complement-Systems treffen sich bei einem gemeinsamen Faktor, nämlich bei:

·       C1

·       C3

·       C5

·       C7

·       C9

Welche Aussage trifft auf kleine GTPasen zu?

·       im aktiven Zustand tragen kleine GTPasen GTP und im inaktiven Zustand liegen sie in GDP-gebundener Form vor

·       Die Aktivierung und inaktivierung von kleinen GTPasen wird durch GAPs und GEFs reguliert

·       können ATP oder GTP hydrolysiren

·       die aktivierte kleine GTPase überträgt das gamma-Phosphat vom GTP an das nachgeschaltete Signalmolekül und phosphoryliert/aktiviert es auf diesem Weg

·       aktivierte kleine GTPasen müssen degradiert werden, um den Signalweg zu inaktivieren

Welche der folgenden Aussagen zum Immunoblotting treffen NICHT zu?

·       Zur Erhöhung der Sensitivität verwendet man häufig Primar-Antikörper, die direkt an HRP (horseradish peroxidase) gekoppelt sind

·       Der im Kurs verwendete 2. Antikörper war mit HRP (horseradish peroxidase) konjugiert

·       Bei der Detektion mittels Chemilumineszenz oxidiert Meerrettich-Peroxidase (HRP) das Substrat Luminol unter Aussendung von Lichtquanten.

·       Bei der im Kurs angewandten kolorimetrischen Detektion ist der zweite Antikörper mit NBT konjugiert, welches das Substrat hydrolysiert

·       BSA (bovine serum albumin) wird häufig zur Blockierung freier Bindestellen auf der Membran verwendet

Welche Aussagen zu SDS-PAGE treffen zu?

·       Der 5x Probenpuffer enthält TEMED als Reduktionsmittel

·       DTT Reduktionsmittel startet die Polymerisation von Acrylamid

·       Das diskontinuierliche (Disk-) Elektrophorese-System besteht aus einem Sammelgel mit pH 6.8 und einem Trenngel mit einem pH von 4.8 

·       Um eine quervernetzte Matrix zu erhalten, ist neben linearem Acrylamid auch N,N'-Methylenbisacrylamid nötig

·       DTT kann die Tertiärstruktur von Proteinen verändern und bricht vorhandene Disulfidbrücken auf

Eine Zelle die nur gp130, aber nicht IL-6R exprimiert, kann trotzdem auf IL-6 reagieren und zwar weil:

·       es gar keinen IL-6R gibt (netter Versuch!)

·       Fibroblasten IL-6 präsentieren

·       lL-6 durch extrazelluläre Proteasen zu IL6-like-peptide abgebaut wird

·       IL-6 mit löslichem IL-6R einen Komplex binden kann

·       die Zellen IL-6 phagozytieren und es an den intrazellulären Anteil von gp130 bindet

Wenn der bakterielle Effektor CagA als ein Adaptermolekül fungiert, mit welchem eukaryotischen Adaptermolekül würden Sie es vergleichen?

·       dem Adapterprotein Nck1

·       dem aktinbindenden Protein Cortactin

·       der Tyrosinkinase Yes

·       dem Dockingprotein Gab1

·       der Rezeptor-Tyrosinkinase EGFR

Wie werden eingeatmete Nanopartikel (10­100 nm) überwiegend beseitigt, wenn sie das alveolare Epithel erreichen?

·       Phagozytose durch alveoläre Makrophagen

·       Penetration ins Blut, dann Ausscheidung über die Nieren

·       Auflösung durch Verdauungsenzyme im Flüssigkeitsfilm der das Epithel bedeckt

·       Nanopartikel dieser Größe gelangen nicht in die Alveolen

·       Transport mit Mucusschicht nach oben (Muco­Ciliary­Escalator), dann verschluckt

1.      Die Rezeptoren der Chemokine sind:

·       Homologe zum IL­2 Rezeptor

·       Homologe zum beta­adrenergen Rezeptor 

·       Ca++-Kanäle

·       Rezeptor­Tyrosinkinasen

·       intrazelluläre Transkriptionsfaktoren

Welche der folgenden Punkte müssen Sie bei der Detektion von phosphoryliertem STAT3 mittels Immunoblotting beachten?

·       Nur wenige Zellen exprimieren STAT3

·       STAT3 liegt bereits in unstimulierten Zellen phosphoryliert vor.

·       Zur Inaktivierung von Phosphatasen muss der Lysepuffer Inhibitoren enthalten

·       STAT3 Phosphorylierung ist durch Immunoblotting nicht nachweisbar

·       Nach Zytokinstimulation ist die STAT3­Phosphorylierung nur wenige Minuten lang nachweisbar 

Welche Aussagen zur Blue native PAGE treffen zu?

·       Bei der Blue native PAGE wird Bromphenolblau als pH-Indikator in das Gel co­polymerisiert

·       Bei der Blue native PAGE wird SDS durch Bromphenolblau ersetzt

·       Blue native PAGE eignet sich zur Auftrennung von Proteinkomplexen

·       SDS wird durch Coomassie blue ersetzt, das an Proteine bindet und für eine negative Ladung sorgt

·       Bei der Blue native PAGE werden die Proteine nach Transfer auf der Membran mittels Coomassie blue detektiert

Welche Reaktion liegt der Nachweisreaktion des Luciferase-basierten Reporter gene assays zugrunde?

Neutrophile können Bakterien töten durch:

Western Blot/Immunoblot: Wählen Sie die richtigen Antworten:

·       Nitrocellulose-Membranen haben generell eine höhere Bindekapazität als PVDF-Membranen

·       Die Zusammensetzung des semi dry Western Blot war wie folgt: Anode – Filterpapier – Membran – Gel – Filterpapier – Kathode

·       Die im Kurs verwendete Membran fürs Blotten war eine Nitrocellulose-Membran

·       Die im Kurs verwendete Membran fürs Blotten war eine PVDF-Membran

·       Die Zusammensetzung des semi dry Western Blot war wie folgt: Kathode – Filterpapier – Membran – Gel – Filterpapier – Anode

Helicobacter pylori kolonisiert den menschlichen Magen und verursacht folgende Erkrankungen und Beschwerden:

Sie behandeln MCF-7 Zellen mit einem JAK Inhibitor und stimulieren anschließend mit IL-6. Welches Ergebnis erwarten Sie?

·       Die Menge von totalem STAT3 bleibt unverändert

·       Eine völlig zufällige Aktivierung von STAT3

·       Die Stimulierung durch IL-6 führt trotz JAK Inhibierung zu einer Aktivierung von STAT3

·       Durch die vorangegangene JAK Inhibierung kann IL-6 nicht mehr den Signalweg aktivieren und STAT3 wird nicht phosphoryliert

·       Durch die Inhibierung von JAK nimmt die Menge an phosphoryliertem STAT3 zu